Бұл аралықтарды жақын бейтарап рН кезінде биологиялық қосымшалар үшін қолдануға болады
Фосфор қышқылына арналған үш күкірт қышқылы (БҚК Химия және физика анықтамалығынан) 2,16, 7,21 және 12,32 құрайды. Мұнда көрсетілгендей, биологиялық қолданбалар үшін, моносадия фосфаты және оның қосылыс негізі, дискодия фосфаты әдетте 7 рН мәндерінің буферлерін шығаруға қолданылады.
Бұл буферді жасау TAE және TBE буферлерін жасаудан гөрі әлдеқайда қиын. Алайда бұл өте қиын емес. Қарапайым орта. Бұл буферді қуып жіберу үшін шамамен 10 минут қажет. Мұнда қалай.
1. Буфер сипаттарында шешіңіз
Аралық жасамас бұрын, алдымен сіз өзіңізге қандай молярлықты, қаншалықты көлемді жасауды және қажетті рН мәнін білуіңіз керек. Аралық көпшілігі 0,1 М және 10 м арасындағы концентрацияларда жақсы жұмыс істейді. PH күкірт қышқылының / коньюгата негізіндегі pKa рН бірлігінің ішінде болуы керек. Қарапайымдылық үшін бұл үлгіні есептеу 1 литр буферге арналған болады.
2. Қышқылдың негізге қатынасын анықтаңыз
Хендерсон-Хассельбалық теңдеуін (төменнен) қышқылдың негізіне қажетті рН мәнін аралық жасау үшін қажет ететінін анықтау үшін пайдаланыңыз. Қажетті рН мәніне жақын pKa мәнін қолданыңыз және ара қатынасы pKa сәйкес келетін қышқыл-негіздік жұп жұбына қатысты болады.
HH теңдеуі: pH = pKa + log ([Base] / [Acid])
PH 6.9 буферінде, [Base] / [Acid] = 0.4898
Ауыстыру үшін [Acid] және Solve for [Base]
Буфердің қажетті молярлығы - бұл [Acid] + [Base] жиынтығы.
1 М буфер үшін [Base] + [Acid] = 1 және [Base] = 1 - [Acid]
Мұны теңдікке теңестіру арқылы, 2-қадамнан бастап сіз:
[Acid] = 0.6712 мол / л
[Acid үшін]
Теңдеуді қолдану: [Base] = 1 - [Acid], сіз мыналарды есептей аласыз:
[Base] = 0,3288 мол / л
3. Қышқыл мен коньюгат негізін араластырыңыз
Хендерсон-Хассельбалық теңдеуін пайдаланып, сіз аралық үшін қышқылға қандай арақатынас қажет екендігін есептеу үшін 1 литр ерітіндіге дейін моносадия фосфатын және диодия фосфатын дұрыс мөлшерде дайындаңыз.
4. РН параметрін тексеріңіз
Аралық үшін дұрыс рН мәніне жеткенін растау үшін рН протеинін пайдаланыңыз. Фосфор қышқылын немесе натрий гидроксидін (NaOH) пайдаланып қажет болған жағдайда сәл түрде реттеңіз.
5. Дыбысты түзетіңіз
Қалаған рН дейін жеткенде, аралық мөлшерін 1 литрге дейін жеткізіңіз. Содан кейін аралықты сұйылттыңыз. Бұл буфер 0,5 М, 0,1 М, 0,05 М аралықтарын немесе арасындағы кез-келген нәрсе жасау үшін разбавлять болады.
6. Буфер үшін кеңестер
PKa нақты мәнге оңай өлшенбейтінін есте сақтаңыз. Әртүрлі дереккөздердегі әдебиеттерде шамалы әртүрлі мәндер болуы мүмкін.
Сізге не қажет
Аралық жасау үшін, сізге үш зат қажет, ал қалған материал - жабдық. Бұл заттар моносадия фосфаты, диодия фосфаты және фосфор қышқылы немесе натрий гидроксиді, рН реттеу үшін.
Сізге сондай-ақ рН көрсеткішін және зондты және тиісті зертханалық керек-жарақтарды қажет етеді. Бұл көлемді шыны ыдысты, цилиндрлерді, бокалдарды және араластырғыштарды қамтиды.
Соңында, сізде араластырғыш ыстық ысқыш керек болады.