Қалай мұздатылған - бактериялық мәдениетті құрғатыңыз (лиофилизация)

Лиофилизации немесе мұздату кептіру - қысқа зертханалық процедура

Лиофилизация немесе криодискалау деп те аталатын мұздаған кептіру - мұздан кейін (одан кейін вакуум астына қойылған) өнімнен суды алу, сұйықтық фазасынан өтпестен мұздың қаттыден буға ауысуына мүмкіндік береді. Мұз (немесе басқа да мұздатылған еріткіштер) сублимация процесі арқылы өнімнен алынып тасталады және судың тұзды молекулалары десорбция процесі арқылы жойылады.

Лиофилизации негіздері

Бактерия, саңырауқұлақ, ашытқы немесе басқа микроорганизм мәдениетін ұзақ уақыт сақтау үшін ең жақсы тәсілдердің бірі - мұздату үрдісін қолдану. Бұл қысқа зертханалық процедураны сіздің мәдениетіңізді сақтайтын кез-келген коммерциялық қол жетімді мұздатқыш-кептіргішпен жүзеге асыруға болады. Лиофилизация - кептірудің ең күрделі және қымбат нысаны болғандықтан, процесс әдетте жоғары мәнге ие нәзік, жылуға сезімтал материалдармен шектеледі. Мұздатудан зақымданған заттар әдетте лиофилизирленуі мүмкін, сондықтан мұздатқыш сақтау қажет емес.

Бұл үдеріс үш сағаттан аз уақыт кетуі мүмкін және мәдениет өсу уақытын қоспағанда 24 сағатқа созылуы мүмкін.

Лиофилизацияның қадамдық процесі

1. Біріншіден, LB микроорганизмінің немесе басқа тиісті қоректік агар пластинасында түнгі мәдениетті немесе көгалдарды өсіріңіз.

2. Содан кейін стерильді бүріккіш қалпақшаларды автоклавты уақытқа дейін дайындаңыз, қақпақтарды (резеңке тығырықтарды) үстіңгі жағына қойыңыз. Автоклавтың алдында түтіктер ішіндегі мәдениет идентификациясымен басылған қағаз белгілерін қойыңыз. Сонымен қатар, стерильділікке арналған қақпақтармен түтіктерді пайдаланыңыз.

1. Пластинадағы 4 мл лиофилизация буферін қосыңыз. Қажет болса, жасушалардың стерильді шыны таяқша көмегімен тоқтатылуы мүмкін.

2. Мәдениет суспензиясын стерильденген шишаларға жылдам аударыңыз. Шишаға шамамен 1,5 мл қосыңыз. Резеңке қақпағын жабыңыз.

3. Флакондарды -20 градус Целыус мұздатқышқа қою арқылы сауыттың ішіндегі мәдениет суспензиясын босатыңыз.

1. Мәдениеттер мұздағаннан кейін мұздатқышты оны айналдырып, тиісті температура мен вакуум жағдайын тұрақтандыруға мүмкіндік беру арқылы дайындаңыз. Мұны сіз қолданып отырған мұздатқыштың белгілі бір бренді үшін өндірушінің нұсқауларына сәйкес орындаңыз.

2. Мұқият және асептикалық түрде, шишаның қақпақтарын мұздату үрдісі кезінде ылғалдың қайнап кетуі үшін және флакондарды мұздатуға арналған камераға орналастыруы үшін, шишалардың үстіне еркін орналастырыңыз. Өндірушінің нұсқауларына сәйкес камераға вакуумды жағыңыз.

3. Мәдениет уақытын толықтай лиофилизирлеуге (кебу) рұқсат етіңіз. Бұл әрбір үлгідегі көлемге және сіздің қанша үлгіңізге байланысты бірнеше сағат бойы түнгі уақытқа дейін кетуі мүмкін.

4. Үлгілерді мұздатқыш камерадан өндірушінің нұсқауларына сәйкес алып тастаңыз және қақпақтарды резеңке қақпақтармен дереу мөрімен жабыңыз, содан кейін кептіргіш шыңдары.

5. Лиофилизденген мәдениет жинағын бөлме температурасында сақтаңыз.

Сізге керек өнімдер

• Мұздаған кептіргіш
• Қоректік немесе басқа тиісті агар пластиналары (және мәдениет өсіруге арналған инкубатор)
• Шыны шкаф
• Лиофилизациялық буфер
• Резеңке тығыздағыштары бар кремді шұңқырлар (қақпақтарды қолдануға арналған жылтырақ)
• Мұздатқыш

<sub>Анықтама:

SP ғылыми. Мұздаған кептірудің негізгі принциптері. http://www.spscientific.com/freeze-drying-lyophilization-basics/</sub>