Сондай-ақ, RFLP талдау деп аталады, бұл әдіс жеке адамдардың генетикалық кодтарындағы полиморфизмдердің артықшылығын пайдаланады. Түрдің барлық мүшелері бірдей генетикалық макияжға ие болса да, бұл шағын айырмашылықтар фенотип түріндегі өзгерістерге, мысалы, адамның арасындағы сыртқы келбетке немесе метаболизмге байланысты.
RFLP: Талдау әдістері мен қосымшалары
RFLP талдау әдістемесі ДНҚ белгілі бір аймағын белгілі шектеу ферменттерімен, одан кейін агарозды гель электрофорезімен бөліп, фрагменттердің санын және салыстырмалы мөлшерін анықтауды айқындайды.
Шектеу энзимі - фермент, ақуыз молекуласы, бұл ДНҚ-ны шектеу орындарында қысқартады. Негізінде, ДНҚ үлгісі сынған энзимдер арқылы бөлініп, сіңіріледі. Алынған фрагменттер олардың ұзындығына сәйкес бөлінеді және фрагменттің өлшемдері әр жеке сыналған үшін әр түрлі болады.
Толық RFLP процесі зондты таңбалауды, ДНҚ үзіндісін, электрофорезді, блоттауды, будандастыруды, жууды және авторганографты талап етеді. Анықталған РФЛП-ны авторганографта рентген-пленка арқылы визуализацияланады, онда ДНҚ бөліктері электрофорез арқылы бір-бірінен бөлінгеннен кейін қаралып, талданады.
RFLP талдауының кейбір қосымшалары мыналарды қамтиды:
- ДНҚ саусақ іздері . Сот сарапшылары қылмыстық сахналарда жиналған дәлелдемелердің үлгілеріне негізделген күдікті адамдарды анықтау үшін РФСЗ талдауын қолдана алады.
- Әке. RFLP сонымен қатар әке болуды анықтау үшін немесе ата-бабаларымызды іздеу үшін қолданылады.
- Гендік әртүрлілік. Бұл техника жануарлардың эволюциясы мен көші-қонын зерттеу, жануарлардың популяцияларындағы асыл тұқымды үлгілерді зерттеу, белгілі бір ауруларды анықтау және диагностикалауда қолданыла алады.
Геномдардағы вариацияны анықтауды RFLP қолдану әдістемесі геномдық картаға және генетикалық ауруларды талдауда маңызды құрал болып табылады. Егер белгілі бір ауру генінің орналасуы белгілі бір хромосомада ізделсе, онда зерттеушілер отбасының мүшелерінің ДНҚ-ны аурумен талдап, одан кейін RFLP аллелінде мұраға ұқсас үлгілерді іздейді.
Ауру гені локализацияланғаннан кейін, басқа жанұя мүшелеріне қатысты РФЛП талдау жүргізу мутант генінің тасымалдаушысын немесе аурудың жалпы қаупін белгілеуі мүмкін. RFLP техникасы кеңінен қолданылады, енді жаңа, аса сенімді әдістер сот және басқа да бірқатар салаларда ДНҚ талдауы үшін пайдаланылады.
Талдаудың теріс аспектісі
Өкінішке орай, RFLP талдау әдістемесі жанбайтын және баяу. Көптеген үлгілік ДНҚ талап етілуімен қатар - үлгі әдетте ДНК үлгілері үшін салыстырмалы үлкен болып табылатын төрттің өлшемі туралы болуы керек - зондты таңбалаудан бастап жууға және аутраниграфияға дейінгі процесте аяқтау үшін толық ай.
Адам геномының жобасының нәтижелері RFLP қажеттілігін ауыстырды. Жоба адамның жасушаларында, адам геномында табылған ДНҚ-ның бүкіл дәйектілігін анықтауға және адам геномының барлық гендерін анықтауға мүмкіндік берді.